检测基因突变的三种方法

检测基因突变的三种方法，是一个专业性术语较强的话题，因为基因突变的类型有很多，检测方法也较多，以ALK基因融合突变为例，其主要有三种检测方法，即FISH检测、Ventana-D5F3 IHC检测和NGS检测，其基因突变检测方法的特点主要体现在以下几方面。
1、FISH：也称为荧光原位杂交技术，其检测的特异性和敏感性都比较高，也是ALK融合基因检测的金标准，因为FISH检测的技术要求比较高，所以也存在有自身问题，如在检测过程中，如果标本固定时间较长、烤片温度较高、变异性温度差异、蛋白消化不当等，就会引起荧光信号的减弱，或者没有信号，容易出现基因突变的假阴性或假阳性；
2、IHC：是一种免疫组化的检测方法，此方法操作比较简单、检测比较快速、经济成本较低，灵敏度较高。因为对标本需求量较低、IHC检测高灵敏度、高特异性等优点，ALK检测共识中已经推荐优先应用；
3、NGS：也称为二代测序、高通量测序技术，这项检测在ALK基因检测中的地位越来越高，NGS检测能区分ALK突变的所有亚型以及ALK基因本身可能存在的点突变，在临床上可以指导医生后续用药，但是检测费用较贵，临床上主要推荐用于ALK靶向药物耐药的患者检测。