精子DNA损伤 现代技术助生育

　　在过去的10多年里，辅助生殖技术（ART）取得了突破性进展，尤其是单精子卵细胞浆内注射（ICSI）技术的应用，使得对严重的少、弱、畸形精子症的治疗取得了重大突破。但大量的研究表明，在ART中，精子DNA损伤影响受精比率、胚细胞发育和妊娠概率，尽管其机制尚不完全清楚，这也使得精子DNA损伤与ART的关系越来越受到重视。

　　精子DNA损伤的来源是多种多样的。对于梗阻性无精子症患者实施ICSI时，从附睾和睾丸中抽取精子时发现，精子DNA损伤水平显著增高。这可能是由于精子在阻塞的生殖管道中存留时间过长，也可能是因为精子DNA解聚不完全，容易受损伤和毒害物质侵害。不同的研究还发现，梗阻性无精子症患者睾丸中的精子DNA损伤水平明显低于附睾精子。因此，针对梗阻性无精子症患者，建议使用睾丸中的精子进行ICSI。一项研究比较了睾丸精子和射出体外的精子进行ICSI的结果，发现睾丸中的精子DNA损伤水平明显低于射出体外的精子，前者进行ICSI后妊娠率也明显高于后者。然而，还有其他研究显示，在未评估精子DNA完整性的情况下，射出精子、附睾精子和睾丸精子进行ICSI的结局并无统计学差异。因此，对于不同来源的精子以及精子DNA损伤对ICSI结局的影响，还需要进一步的研究。

　　除了在ICSI中的应用，精子DNA损伤也对宫腔内注射（IUI）和体外受精（IVF）的结局产生影响。研究发现，当精子DNA损伤指数（DFI）大于30%时，IUI中的受精机率几乎为零。而使用末端转移酶介导的dUTP末端标记法（TUNEL）评估，当DFI大于12%时，不能发生妊娠，而DFI在10%到12%之间时，会导致流产。因此，在IUI中，评估DFI可以作为一个较好的预后指标。而在IVF中，精子DNA损伤不仅影响受精机率和胚泡发育，还与胚胎质量显著负相关。研究发现，当DFI超过36.5%时，IVF中的妊娠率显著下降；而DFI阈值在27%左右则是成功妊娠所必需的。因此，DFI可能成为IVF中较好的预后评估手段之一。

　　在ICSI中，虽然精子DNA损伤不能阻止受精和胚体形成，甚至使用DNA损伤较高的精子也能实现妊娠，但精子DNA损伤与受精和妊娠率之间仍然存在显著负相关。研究发现，当DFI超过30%时，常会出现低胚泡率，且很难发生妊娠。因此，在进行ICSI之前，评估精子DNA的完整性非常重要。

　　此外，精子的冷藏技术也被发现会损伤精子DNA的完整性。报道显示，与新鲜精子相比，经过冷冻和解冻的精子DNA断裂率显著增高。冷冻过程中，精子的脱水和胞浆水分减少，可能导致染色质不正常聚集，从而影响染色质的浓缩和转录，使精子无法进行DNA修复。此外，冷冻复苏时，精子核周围的离子环境发生巨大变化，可能导致精子DNA与鱼精蛋白分离。

　　最后，精子体外处理技术也对精子DNA完整性有着密切的关系。研究表明，适当的体外处理可以提高精子DNA的完整性，但不适当的处理可能导致DNA损伤。处理时间过长、离心步骤过多、离心速度过快等都会造成精子的物理损伤并产生氧化物和活性氧，导致精子DNA氧化损伤。

　　综上所述，精子DNA损伤对于辅助生殖技术的成功与否有着重要影响。因此，在ART过程中，评估精子DNA的完整性非常重要，可以帮助医生选择合适的治疗方案，提高妊娠成功的概率。此外，对于冷藏和体外处理技术，需要谨慎操作，以避免对精子DNA的损伤。随着技术的不断进步，相信将有更多的方法可以用于检测和修复精子DNA损伤，进一步提高辅助生殖技术的成功率。

　　注：

　　DFI（DNA fragmentation index）指精子DNA的损伤程度，DFI越高表示精子DNA损伤越严重。