肺炎支原体可从咳痰或咽拭子中培养出来,但分离和鉴定需7~10天,但许多医院的实验室无法作此项检查.痰革兰氏染色见少量细菌,多形核白细胞,巨噬细胞以及大块脱落的呼吸道上皮细胞.胸部X线改变多种多样,但最常见的是两肺下叶片状支气管肺炎,大叶性实变和胸腔积液不多见.周围血白细胞一般正常或有轻度增多.冷凝集反应如连续有滴度升高4倍者或一次滴定效价≥1:64,一般认为是阳性.但只有50%~75%的病人呈阳性,并不绝对可靠.最实用的是采用血清学检测(最常用的标准是IgM单独升高,或滴度有4倍升高且在症状出现2~4周之后出现滴度高峰(≥1:64).