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结核性腹膜炎--腹水生化检验

结核性腹膜炎--腹水生化检验

结核性腹膜炎--腹水生化检验:结核性腹膜炎(tuberculousperitonitis)是由结核杆菌引起的慢性弥漫性腹膜感染。本病以儿童和青壮年多见,女性多于男性。常合并腹腔内结核病变,包括肠结核、肠系膜淋巴结结核及输卵管结核等。

1.总蛋白(TP)是鉴别渗出液和漏出液最有用的试验,渗出液总蛋白一般>30g/L,结核性腹水呈渗出性改变。

2.血清腹水清蛋白梯度(SAAG)结核性腹膜炎患者SAAG<11g/L,对不合并慢性肝病的结核性腹膜炎患者,SAAG的诊断灵敏度接近100%。但SAAG不能区别结核性腹膜炎与恶性肿瘤性腹水。

3.葡萄糖(GLU)结核性腹水葡萄糖浓度也可降低,但一般在1.7~3.1mmol/L之间。狼疮性腹水和恶性肿瘤性腹水与结核性腹水类似,在细菌感染性腹水,尤其是脓性腹水,葡萄糖含量显著下降。

4.腺苷脱氨酶(ADA)结核性腹水ADA活性明显高于外周血中ADA。国内提出腹水ADA大于40U/L应考虑为结核性。当抗结核药物治疗有效时,其腹永内ADA也应随之下降,因此也可作为抗结核治疗时疗效观察指标。此外,风湿性腹水及脓性腹水中ADA活性明显高于其他渗出液中,以腹水中ADA>50U/L为限,可将结核性腹水同恶性肿瘤性腹水区分开,但不能将结核性腹水同风湿性腹水等鉴别。非结核性腹水包括恶性肿瘤性腹水、狼疮性腹水患者,其腹水ADA活性与血清中基本相同。

5.乳酸脱氢酶(LDH)腹水LDH>200U/L,或LDH/血清LDH>0.6可作为渗出液的指标。结核性腹水LDH稍高于这些界值。

【腹水特殊检验】

1.腹水结核分枝杆菌培养

(1)培养方法:将浓缩的腹水标本接种于相应的固体培养基,置37℃每周观察一次,直至6~8周,根据生长时间、菌落形态以及是否产生色素等特点,加以判断。

(2)临床应用价值:对于腹水结核分枝杆菌培养阳性者,可以确诊为结核性腹水。

2.腹水结核杆菌DNAPCR是近年建立的一种简便、高效的DNA体外扩增技术。PCR技术与传统检验方法相比较,简便、实用性强、敏感性和特异性较高,特别适用于体外难于培养和生长缓慢的病原微生物的诊断。应用PCR技术,测定结核杆菌的基因序列,其诊断结核的敏感性和特异性均为100%。

3.溶菌酶(LZM)

(1)测定方法:可采用平板法,其原理为溶菌酶与微球菌作用后可使该菌因细胞壁破坏而溶解,致使加样孔周围出现溶菌环。溶菌环直径与样品溶菌酶含量的对数呈线性关系。

(2)临床应用价值:94%的结核性腹水中溶菌酶含量超过30mg/L,明显高于癌性腹水。漏出性腹水中通常为0~5mg/L。

4.T细胞亚群

(1)测定方法:常用流式细胞分析技术。

(2)临床应用价值:结核性腹水中以淋巴细胞为主,其中T细胞增加明显,T细胞又以T4为主(55%~75.0%),T4/T8比值升高为3.22±1.63。T4细胞的绝对数与腹水量呈负相关.腹水中,T3、T4的百分数及绝对数都高于自身外周血。而癌性腹水的T细胞虽然也增加,但低于结核性腹水,并分别低于外周血,因此检测T细胞亚群也可作为鉴别结核性和癌性腹水的参考指标。外周血T3细胞阳性率为71.5%±6.2%,T4细胞阳性率为45.7%±5.3%,T8细胞阳性率27.9%±5.0%,T4/T8比值为1.66±0.33。

5.γ-干扰素(γ-Interferons,γ-IFN)结核性腹水中γ-IFN升高,平均为91U/ml。而其他性质的腹水γ-IFN均低于2U/ml,因此腹水中γ-IFN测定对结核性腹水的鉴别诊断是一项参考指标。

6.肿瘤坏死因子(TNF)结核性腹水中TNF平均为545ng/L(210~1530ng/L),其自身血清TNF为102ng/L(0~237ng/L)。而非结核性腹水TNF为62ng/L,明显低于结核性腹水,因此测定TNF有助于结核性腹水的鉴别诊断。

【血液检验】

1.红细胞沉降率

(1)测定方法:传统的方法是魏氏法,它是将一定量的抗凝血置于特制的刻度管内(称魏氏血沉管),垂直立于室温,红细胞会自然下沉,60分钟测量管内血浆高度即为红细胞沉降率,结果以mm/h报告。目前大多数医院采用动态血沉分析仪法,原理是将抗凝血加入特制的小试管内,垂直放置仪器内部,仪器的光电检测部件会以一定的时间间隔扫描小试管,根据其透光度不同,仪器自动记录每次的血浆高度。通过计算处理,可报告60分钟的血沉值并绘制血沉一时间(H-t)曲线。

(2)参考值:男性为<15mm/h,女性为<20mm/h。

(3)临床应用价值:红细胞沉降率可作为病变活动的过筛指标,在本病活动期一般增快,病变趋于静止时逐渐正常。根据H-t曲线特性,可将动态血沉分成5种类型:持续速降型、持续缓降型、前期速降型、后期速降型、阶梯型。健康男性以阶梯型为主;女性以持续缓降型为主;结核活动期以前期速降型为主;风湿热、急性炎症、恶性肿瘤、SLE等以持续速降型多见,而良性肿瘤、结核缓解期则以持续缓降型或后期速降型为主。

(4)测定方法评价:魏氏法检测血沉受到抗凝剂、用血量、血沉管位置等方面的影响,如血沉管倾斜、温度升高致使血沉加快。仪器法已基本上避免了血沉管的影响因素。

(5)标本要求:抽血后要及时加入到有抗凝剂的试管中,不能有凝固,也不能有溶血。抗凝剂应准确,109mmol/L枸橼酸钠与血液按1:4比例混合,目前已有一次性使用的带抗凝剂的塑料血沉管。

2.血液白细胞计数

(1)测定方法:传统的白细胞计数用牛鲍氏计数板显微镜计数。目前大多采用血细胞分析仪计数,即EDTA-K2抗凝血混匀后上机测定,计算出单位体积内的白细胞数。也有一些血液学分析仪采用光学法检测白细胞数量。

(2)参考范围:成人(4~10)×109/L,儿童偏高。

(3)临床应用价值:结核性腹膜炎患者多数正常或稍偏高,少数偏低。但腹腔结核病灶急性扩散者或干酪型患者的白细胞计数可增高。

(4)测定方法评价;由于白细胞存在生理性变化,如运动后、疼痛、情绪紧张、进食后白细胞增高,正常人下午比上午细胞数高等,同时一些药物对白细胞也有影响,所以要选择多次同一时间段检验,以明确诊断。

(5)标本要求:采用抗凝血标本,常用EDTA盐为抗凝剂,血细胞分析仪需用EDTA-K2作抗凝剂。

3.血清结核杆菌抗体

(1)测定方法:ELISA间接法。用纯化的结核分枝杆菌外膜抗原包被微}L板,待测血清中相应抗体与之特异结合,再与加入的酶标抗人IgG结合,显色测定。按标本A值/临界A值(S/CO)来判断结果。一般,S/CO≥1.0为阳性,S/CO<1.0为阴性。

(2)参考值:阴性。

(3)临床应用价值:对结核分枝杆菌感染.特别是肺外感染,或无法分离到结核分枝杆菌患者,血清结核杆菌抗体有一定的辅助诊断价值,但特异性和灵敏度均不高。结核性腹水中也可能存在结核杆菌抗体,检测方法相同。

(4)测定方法评价:反应温度和时间应按规定的要求,洗涤是ELISA实验成败的关键。

【检验综合应用评价】

对疑似患者,可进行腹水的一般检验和腹水的生化检验,以及血液红细胞沉降率测定。腹水ADA对结核性腹膜炎诊断价值最大且方法简便;外周血红细胞沉降率能支持结核性的诊断;白细胞数可以与其他感染性疾病鉴别;腹水常规和TP大多呈渗出液改变;SAAG能提高诊断灵敏度;腹水GLU下降不明显,但可与其他细菌感染性腹水相鉴别。

如果检验结果不典型,可以进一步进行结核杆菌抗体,腹水LDH以及其他腹水特殊检验,这些检验对于结核性腹膜炎诊断与鉴别诊断也有一定的意义。根据条件也可以分别进行腹水结核分枝杆菌培养和腹水结核杆菌DNA检验,可使诊断结核的敏感度和特异度大为提高。